Progetto di Studio genetico-clinico sulla Malattia di Behcet

Razionale ed obiettivi

La sindrome di Behcet è una malattia infiammatoria multisistemica caratterizzata da una over espressione di citochine prodotte dalle cellule Th1 ed a funzione pro-infiammatoria evidente durante le fasi attive della malattia di Behcet (IL1, 6, 8, 12, 18, TNF-a).

Progetto genetico

Lo scopo del presente progetto è la caratterizzazione del profilo globale di espressione genica su acido ribonucleico (RNA) estratto da prelievi di sangue periferico di soggetti affetti dalla malattia di Behcet mediante GeneChip Affymetrix HG133A. I campioni dovranno essere clinicamente suddivisi in quattro classi fenotipiche (A:con complicanze neurologiche; B:con complicanze gastrointestinali; C:con complicanze angiologiche; D:a prognosi benigna). Dati preliminari riguardano esperimenti su RNA di soggetti Behcet con fenotipo A, soggetti Behcet con fenotipo D e soggetti sani di controllo. Ci si propone di condurre altri esperimenti su queste tre classi fenotipiche al fine di aumentare la significatività statistica dei dati ottenuti e di effettuare esperimenti su RNA di soggetti Behcet con fenotipo B e C.Dopo questa prima parte del progetto effettuata su GeneChip, seguirà una fase successiva di data mining in cui si isoleranno quei geni la cui espressione nei soggetti affetti varia rispetto ai controlli sani e quei geni il cui profilo di espressione è caratteristico della singola classe fenotipica. Il fine di questa seconda parte dello studio è quello di isolare ed identificare quei geni che risultano maggiormente coinvolti nei pazienti rispetto ai soggetti sani di controllo ed in secondo luogo isolare ed identificare quei geni che si attivano in ciascuna classe fenotipica, contribuendo all’insorgenza di taluni segni clinici rispetto ad altri, con risvolti sul piano clinico e farmacologico. L’espressione di quei geni di particolare interesse ai fini dello studio sarà verificata mediante esperimenti di “Real Time PCR”, una tecnologia rivoluzionaria che permette la determinazione qualitativa e quantitativa del DNA o RNA "target" in tempi estremamente ridotti, in quanto il segnale viene emesso e rilevato in "tempo reale" durante la fase di amplificazione. Tale studio verrà esteso a tutti i centri di riferimento italiani che daranno la loro disponibilità,previa presentazione ad ogni comitato etico,del progetto stesso per l’approvazione.

Progetto clinico

A tale studio genetico, verrà affiancato uno studio clinico condotto da professionisti di comprovata esperienza nella diagnosi e cura della m. di behcet a cui saranno indirizzati tutti i pazienti che accetteranno di partecipare al progetto.Per facilitare l’affluenza territoriale dei pazienti saranno identificati almeno tre referenti clinici per questa parte del progetto uno al nord,uno al centro,uno al sud italia.I medici incaricati,riceveranno i pazienti sottoponendoli a visita medica e raccogliendo interamente l’anamnesi completa di ognuno,nonché i risultati degli esami ematici di routine.Ci si propone di dimostrare se esistano sintomi e coinvolgimenti di organi ed apparati fino ad ora non relazionati in letteratura alla malattia e che, dopo qualche anno dall’instaurarsi della patologia,la negatività degli esami di laboratorio concernenti soprattutto l’attività di malattia (ves,pcr,fibrinogeno) non indicano una remissione della stessa ma bensì l’instaurarsi di una fase di cronicizzazione.Tale studio si propone altresì di fornire dati nuovi e reali circa la diffusione,l’andamento, l’evoluzione e la prognosi della m. di behcet in italia.